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| CAS1135-40-6 CAPS與Tris在電泳實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用 |
CAPS試劑即環(huán)己胺丙磺酸，是一種氨基磺酸鹽，具有兩性，應(yīng)用最廣泛的就是在水性聚異氰酸酯涂料中以及HPLC分離、SDS-PAGE凝膠電泳等生化實(shí)驗(yàn)的生物緩沖液中。
作為生物緩沖液時(shí)，CAPS與Tris、MOPS類(lèi)似，都可用于電泳緩沖液，但又有區(qū)別，我們可以先了解下電泳緩沖液的要求。電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)作用下，想著與其電性相反的電極移動(dòng)，在確定條件下，帶電粒子的移動(dòng)速率（遷移率）固定。生化實(shí)驗(yàn)中，帶電粒子通常是蛋白質(zhì)膠粒、核酸等，不同的蛋白質(zhì)或核酸遷移率不同，從而會(huì)相互分離。由于蛋白質(zhì)和核酸顆粒對(duì)pH非常敏感，所以電泳液中必須加入緩沖劑來(lái)保護(hù)蛋白質(zhì)或者核酸。
環(huán)己胺丙磺酸CAPS
在外加電場(chǎng)的電壓固定和電泳時(shí)間等條件相同時(shí)，不同的電泳粒子遷移率不同，所以蛋白質(zhì)或核酸的大小不同或種類(lèi)不同，遷移率就不同。不同粒子的遷移率差值即分開(kāi)距離與電壓和電泳時(shí)間成正比。根據(jù)電泳粒子的大小不一，其使用的電泳緩沖液也不一樣。
CAPS緩沖液：適用于高分子量的蛋白質(zhì)（大于20KD）的電泳，即western blot。由于CAPS制成的電泳緩沖液中只含有EDTA、甲醇，蛋白質(zhì)凝膠電泳PVDF不僅用于蛋白質(zhì)的分離，也可以用于后續(xù)的蛋白質(zhì)測(cè)序。
Tris緩沖液：通常用于核酸DNA的電泳，即Southern blot。其中TEA用于大于13kb的DNA片段，分離效果好，可用于回收DNA；TBA用于小于1kb的DNA 片段，不過(guò)其中的硼酸會(huì)影響DNA回收及后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。Tris也可以用于低分子量蛋白的印跡實(shí)驗(yàn)，不過(guò)要進(jìn)行蛋白質(zhì)測(cè)序時(shí)不能用帶有甘氨酸，需要用Tris-Tricine+EDTA緩沖體系。
MOPS緩沖液：電泳時(shí)通常用于配制RNA電泳緩沖液，即Northern blot。
除了上述的CAPS、Tris、MOPS之外，還有一些其它的電泳緩沖液，在整個(gè)電印跡實(shí)驗(yàn)中，緩沖液的成本與核酸染料、蛋白質(zhì)等比起來(lái)占比是較少的，建議使用優(yōu)質(zhì)的緩沖劑原料確保實(shí)驗(yàn)效果，德晟專(zhuān)門(mén)從事各種生物緩沖劑研發(fā)生產(chǎn)的，可以滿足不同實(shí)驗(yàn)的緩沖劑要求。 |
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