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廣州維伯鑫生物科技股份有限公司
| 聯(lián)系人:戴老師
女士 (銷售代表) |
| 電 話:020-66377266 |
手 機(jī):13539886748  |
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| 慢病毒包裝 |
在有關(guān)轉(zhuǎn)染的研究中,為了感染原代細(xì)胞和難感染的細(xì)胞系,研究者借助于病毒載體實(shí)現(xiàn)。由于慢病毒可以同時(shí)感染分裂和非分裂細(xì)胞、整合性以及免疫原性低等優(yōu)點(diǎn),目前在RNAi的研究中,基于慢病毒構(gòu)建的shRNA被最廣泛的使用。而在RNAi研究需要長(zhǎng)期觀察或者需要進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),基于慢病毒構(gòu)建的shRNA的優(yōu)勢(shì)更為明顯。 我們能夠?yàn)槟峁┌≧NAi靶序列設(shè)計(jì)、慢病毒載體構(gòu)建、測(cè)序、慢病毒生產(chǎn)等一站式服務(wù)。
◇ 服務(wù)內(nèi)容和流程:
1)根據(jù)目的基因相關(guān)信息(序列,序列號(hào)等),對(duì)每條目的設(shè)計(jì)3條siRNA序列,其中一條序列為陰性對(duì)照組;
2)根據(jù)設(shè)計(jì)好的 siRNA序列,設(shè)計(jì),合成兩條互補(bǔ)的短片段的DNA;
3)對(duì)合成好的 DNA片段進(jìn)行稀釋,退火,連接到線形化處理過的載體,轉(zhuǎn)化,涂平板,過夜培養(yǎng);
4)通過 PCR的方法篩選陽性菌落,進(jìn)行測(cè)序,分析測(cè)序結(jié)果;
5)對(duì)于測(cè)序正確的重組質(zhì)粒,提取和純化高質(zhì)量的不含內(nèi)毒素的 siRNA病毒穿梭質(zhì)粒;
6)利用構(gòu)建好的質(zhì)粒做轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn), 48小時(shí)后通過實(shí)時(shí)熒光定量和Western的方法分析目的基因,篩選出一條最有效的siRNA序列;
7)篩選出的高效重組載體和病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染 293T細(xì)胞,進(jìn)行病毒包裝和生產(chǎn),收集病毒液;
8)濃縮、純化病毒液,測(cè)定滴度。
◇ 您只需提供:
靶基因信息。
◇ 我們提供:
慢病毒包裝的實(shí)驗(yàn)報(bào)告單,含實(shí)驗(yàn)材料方法和結(jié)果,
提供108TU/ml病毒(1ml)和對(duì)照病毒。
◇ 實(shí)驗(yàn)周期:6-7周。
◇ 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):詢價(jià)。 |
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