原理:利用離心柱內(nèi)惰性大分子膜提取病料 DNA 作為模板,以引物為起點(diǎn)合成與 DNA 模板,在熱啟動(dòng) Taq 酶的作用下,經(jīng)高溫變性、中溫退火及延伸的循環(huán),使特異 DNA 片段的拷貝數(shù)放大一倍,經(jīng)熒光素標(biāo)記的探針與擴(kuò)增的 DNA 雜交,利用 Taq 聚合酶的 5'→3'外切活性,使熒光探針的報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出特異性熒光信號,利用熒光 PCR 儀檢測特異性熒光信號,根據(jù)樣品 Ct 值的大小及擴(kuò)增曲線的形成情況判定結(jié)果。